Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型乳癌患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次注意到呼吸道自身HIV到注意到1改型白血病外科征状的困难重重率在学童后期就有极好的叙述，多个呼吸道自身HIV乙型肝炎的学童中的有70%在血清转换后10年内患上白血病，而随访15年的学童这一%-减少到84%。远比，占外科1改型白血病一半以上的改型1改型白血病的确诊机制还没有得到适当的深入研究。

越来越多的人开始适用分期系统来假定1改型白血病的困难重重：性状在注意到多种呼吸道自身HIV时重回第1阶段，注意到体温正因如此其时重回第2阶段，注意到征状时重回第3阶段。一些多发呼吸道自身HIV乙型肝炎的性状，在1期和2期，困难重重更慢，并工业发展为确诊的1改型白血病。我们前叙述了一四组在首次样品到多种呼吸道自身HIV试样后将近10年无白血病的正因如此更慢困难重重者，这四组病症人数少，但外观上非常一致。随后，我们推断成呼吸道自身抗原特异性CD8+T细胞核自由基在困难重重很更慢的病症中的大形体不存有，但在近期确诊和起因于的白血病病症中的很容易样品到。这有可能表明，与困难重重病症相对于，这些病症自身免疫自由基的恒定减慢。

早期深入研究表明，尽管恒定性T细胞核(Treg)数量短时间，但白血病病症存有一些机制缺陷，其中的之外对IL-2的自由基能力减低。此外，白血病病症中的的effectCD4+T细胞核有可能对恒定更加具抵抗性，表现为effectT细胞核的可抑制减慢，自然产生的Treg和形胃产生的其会Treg，以及抗原经历的CD4+T细胞核中的IL-2自由基减慢。本深入研究的借以是叙述了CD4+恒定性T细胞核(Treg)在一小群正因如此很更慢困难重重者中的的外观上，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

分析方法：BOX深入研究是一项以许多人为了将的垂直深入研究，在21岁以下确诊的病症亲属中的检查1改型白血病的危险心理因素。我们前叙述了长期很更慢困难重重者的外观上，他们保持良好多重呼吸道自身HIV乙型肝炎有约10年，但没有注意到白血病的外科征状，更慢性或非开展性自身免疫。随后，10名继续保持良好无白血病并愿意之外大量血液试样的很更慢困难重重者确立T和B细胞核机制系统性。在现今的深入研究中的，8名更慢困难重重者(SP四组)，中的位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁彼此间的呼吸道自身HIV乙型肝炎。所有的与会者都西北面1改型白血病困难重重的1期，尽管一些人随后失去了呼吸道自身HIV对某些抗原的乙型肝炎自由基，然而，一名病症早已西北面2期将近6年，但没有注意到外科征状，一名病症被诊断为白血病，该受试者72岁，在通过观察实验试样时，其HbA1c急剧下降到53 mmol/mol(7%)，在数据系统性中的对该酪氨酸开展了实际上评估。分离外周血单个核细胞核(PBMCs)，采用多模板流式细胞核绝技和T细胞核可抑制试验车评估酪氨酸中的Treg的基频、表改型和机制。适用FlowSOM和CITRUS(聚类检验、密切相关和回归)开展无监督聚类系统性，评估Treg表改型。

结果：与肥胖酪氨酸相对于，来自更慢困难重重形体的潜意识CD4+T细胞核的监督聚类看成，转录的潜意识CD4+ Treg基频减少，与持续性其会的TNFR之外细胞(GITR)隐含减少有关。一名HbA1c急剧下降的病症与困难重重很更慢者和匹配的比对四组相对于，Treg谱有所多种不同。机制系统性表明，与肥胖酪氨酸相对于，来自很更慢困难重重形体的Treg依赖性的CD4+effectT细胞核可抑制明显损伤。表现为对effectCD4+T细胞核CD25和CD134隐含的可抑制减少。

由此可知1 深入的表改型系统性看成，CD4+Treg亚改型在更慢困难重重队列中的减少。由FlowSOM分解的Treg二楼，聚集在来自所有酪氨酸的活CD4+CD45RA -细胞核上。根据标识物隐含检验成10个元簇:潜意识T细胞核_1;潜意识T cell_2;潜意识T cell_3;潜意识T cell_4;CD49b潜意识T细胞核;HLA-DR + GITR +潜意识T细胞核;缓存Treg_1;缓存Treg_2;缓存Treg_3;和缓存Treg_4。(a)适用9个多种不同Treg标识分解的10个元簇的MST。每个链表象征性一个集群(100个集群)，更加大的元集群(10个元集群)在链表四组周围上色。每个链表中的的点心由此可知说明单个标识的隐含最高级别。(b)每个元聚类的热由此可知，以看成整形体标识隐含。(c, d)为HD四组(c)和SP四组(d)分解由此可知，以及FlowSOM辨识的每个元簇的大块。(e-l)相对于核素为每个metacluster箱内曲两条路线由此可知(核素> 0.05%)已确定为HD和SP四组:缓存Treg_2 (e),缓存Treg_3 (f),缓存Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +潜意识T细胞核(h)、潜意识T cell_1(i),潜意识T cell_2 (j),潜意识T cell_3 (k) n d CD49b潜意识T细胞核(l)。绿色带子象征性**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验。此键适用于由此可知形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

由此可知2 适用CITRUS的系统结构断定，Treg基频的减少是困难重重很更慢的标识。分级奈斯(a - f)和水果系统性(g-k)比较SP与会者和匹配的HD与会者在CD4+CD45RA−T细胞核上的差异性。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l族群的象征性性由此可知。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR隐含开展分离，模拟FlowSOM族群。(b) HD(黑点)和SP(布氏)四组以及酪氨酸SP 606(绿色)中的CD25+ cd127的基频汇总由此可知。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+奈斯孙子集的箱内曲两条路线由此可知;(c) HLA-DRloGITR−(缓存Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(缓存Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(缓存Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+缓存T cell)。(g - i)柑桔簇双螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3隐含强度上色，圆圈值得注意的簇被辨识为SP和HD队列彼此间的多种不同。(j)箱内曲两条路线由此可知看成了在SP(布氏)和HD(灰点)四组中的，CITRUS潜意识Treg_3和Treg_4的相对于核素(%-)。(k)直方由此可知看成每个簇的表改型(白色)和Treg标识相对于隐含与氛围隐含(金色);上列，缓存Treg_3;后面一行，缓存Treg_4。氛围与所有其他簇中的标识的隐含有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验

由此可知3 与肥胖献血者相对于，困难重重很更慢者潜意识treg的GITR减少。每个潜意识CD4+T细胞核元簇(潜意识T细胞核_1;潜意识T cell_2;潜意识T cell_3;CD49b +潜意识T细胞核;HLA-DR + GITR +潜意识T细胞核;缓存Treg_2;缓存Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)样品每个隐含标识的改变。(a,b)来自HD (a)和S (b)队列的隐含热由此可知(sp606不之外在内)。(c,d)潜意识Treg_4元簇中的所有HD(灰色)、所有SP(金色)和SP 606(绿色)的FlowSOM GITR隐含串联，看成直方由此可知(c)和汇总由此可知(d)。Wilcoxon配对符号秩和检验，p< 0.07(绿色)所有酪氨酸之外，p< 0.05(金色)酪氨酸SP 606和匹配的HD不之外在测试中的。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中的GITR隐含，从分级奈斯，从所有HD(灰色)、所有SP(金色)和SP 606(绿色)串联，看成直方由此可知(e)和汇总由此可知(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对符号秩检验

由此可知4 来自很更慢困难重重的CD4+ treg细胞核控制effectCD4+T细胞核的能力减低。SP四组用金色的两条路线和带子说明，HD四组用紫色的两条路线和带子说明，绿色的两条路线/带子说明酪氨酸sp606。适用CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞核开展分选。CD4+CD25−(这样的话者)被标识为CFSE, Treg按判读的%-滴定。用抗CD3 /28微珠转录细胞核，养成3紧接著开展流式细胞核绝技样品。(a-d)与CD4+这样的话者相对于应的treg养成(其会)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD这样的话者养成。(a,b,f) CFSE转化(a,e)和CFSE可抑制%-(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的可抑制%-。适用乙型肝炎比对(转录的响应细胞核包含treg)测算可抑制%-。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差系统性。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

由此可知5 effectCD4+T细胞核对很更慢困难重重的T细胞核转录的可抑制更加敏感。SP四组用金色的两条路线和带子说明，HD四组用紫色的两条路线和带子说明，绿色的两条路线/带子说明酪氨酸sp606。适用CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞核开展分选。CD4+CD25−(这样的话者)被cfsel标识，treg按判读的%-滴定。用抗CD3 /28微珠转录细胞核，养成3紧接著开展流式细胞核绝技(CD25反染)和细胞核因孙子系统性。HD Treg与HD、SP或sp606这样的话者都由养成。(a,b) CFSE转化(a)和CFSE可抑制调升(b)。(c,d) CD25可抑制调升(c)和CD134可抑制调升(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共养成中的的隐含。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差系统性。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

假设：我们算成的假设是，来自很更慢困难重重孙子的转录潜意识CD4+Treg在GITR隐含中的得到了扩展和丰富，强调了进一步深入研究Treg在1改型白血病可能性性状中的的异质性的必要性。

原文成处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28